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中压层析柱的使用方法可能因具体情况而有所不同

更新时间:2022-11-09      点击次数:143
  中压层析柱是一种常用的分离和纯化技术,在化学、生物、制药等领域有广泛应用。以下是中压层析柱的使用方法:
 
  一、准备工作:
 
  1.选择适当的色谱填料:根据分离目标选择合适的色谱填料,如凝胶过滤、离子交换、亲和层析等。
 
  2.准备层析柱:选择合适的柱子尺寸和材料,并进行装填填料。
 
  二、手动装填填料:
 
  1.准备填料:将色谱填料充分悬浮在适当的溶液中,以获得均匀的悬浮液。
 
  2.填充柱子:将悬浮液缓慢地注入柱子中,使之自下而上均匀填充。注意避免气泡和空隙的形成。
 

 

  三、动态装填填料:
 
  1.使用专业的层析仪器:利用自动层析设备或液相色谱系统进行填充。
 
  2.设置适当的操作参数:根据填料种类,设定合适的流速、压力和梯度等参数。
 
  四、样品加载:
 
  1.选择适当的加载缓冲液:根据样品的特性选择合适的缓冲液,并进行预处理。
 
  2.注射样品:使用适当的装置将样品缓慢地注射到层析柱底部,避免气泡的产生。
 
  五、层析过程及监控:
 
  1.运行层析:根据预设的梯度或流速,开始进行层析过程。
 
  2.监控进样峰和分离峰:通过检测器(如紫外-可见光谱仪、荧光检测器等)实时监控样品的进样峰和分离峰。
 
  六、柱洗脱:
 
  1.切换洗脱缓冲液:根据需要,改变洗脱缓冲液的组成,实现样品的逐步洗脱。
 
  2.收集洗脱分离物:设置适当时间间隔,根据需求收集柱子中洗脱出来的分离物。
 
  七、维护层析柱:
 
  1.柱子再生:根据填料和柱子材料的要求,进行柱洗脱后的再生处理。
 
  2.储存柱子:避免柱子干燥和落尘,储存于干燥的环境中,使用前进行柱平衡。
 
  需要注意的是,中压层析柱的使用方法可能因具体情况而有所不同,请根据实际需求和操作手册进行操作。另外,对于初次使用层析柱的用户,最好在专业人员的指导下进行操作,确保安全和准确性。

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